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如何設計標準聚合酶鏈反應實驗室

文章出處:www.chuabenhdongduoc.com 人氣:發表時間:2019-12-28 16:04

聚合酶鏈反應實驗室也被稱為基因擴增實驗室。聚合酶鏈反應實驗室不僅可用于基礎研究,如基因分離、克隆和核酸序列分析,還可用于疾病診斷或任何有脫氧核糖核酸和核糖核酸的地方。如何科學地設計標準聚合酶鏈反應實驗室?讓業創推廣如下:

1,實驗室平面布局design

聚合酶鏈反應實驗室原則上分為三個獨立的工作區:試劑儲存和制備區、樣品制備區、擴增和擴增產物分析區。為避免交叉污染,進入每個工作區域必須嚴格遵循單一方向,即僅從試劑儲存和制備區域→樣品制備區域→擴增和擴增產物分析區域。試劑和每個實驗區域之間的樣品轉移應通過轉移窗口進行。

2,實驗室空調通風系統設計和壓力控制

聚合酶鏈反應實驗室沒有嚴格的凈化等級要求,但為了避免各實驗區之間交叉污染的可能性,建議采用全輸送和全排氣的配氣方式。同時,應嚴格控制供氣和排氣的比例,以保證每個實驗區的壓力要求。

(1)試劑儲存和準備區

該實驗區的主要操作是準備試劑儲存、分裝試劑和準備主反應混合物。試劑和用于樣品生產的材料應直接運輸到該區域,不得通過其他區域。試劑原材料必須儲存在該區域,并且必須在該區域準備所需的儲存庫試劑。為了控制氣流壓力,該區域應保持向外的輕微正壓。

(2)樣品制備區

該區的主要操作是樣品的保存、核酸(核糖核酸、脫氧核糖核酸)的提取和儲存,以及將它們加入擴增反應管和測定脫氧核糖核酸的合成。該區域的壓力梯度要求相對于鄰近區域為正壓,以避免氣溶膠污染從鄰近區域進入該區域。此外,由于樣品添加操作過程中可能會出現氣溶膠污染,應避免在該區域不必要的行走。

(3)擴增和擴增產物的區域分析

該區域的主要操作是脫氧核糖核酸擴增和測定片段的擴增。此外,也可以在該區域將制備的脫氧核糖核酸模板(來自樣品制備區域)和主反應混合物(來自試劑儲存和制備區域)的制備加入到反應混合物中。該區域的壓力梯度要求相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從該區域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染,在這一地區不必要的步行應該減少到最低限度。樣品添加等單獨操作應在超凈工作臺上進行。

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